什么是補(bǔ)骨脂素?補(bǔ)骨脂素為光敏性化合物,需輔以日光或紫外線照射。用藥后作用于受損細(xì)胞鄰近尚未*破壞或正常的黑素細(xì)胞,使酪氨酸酶活性增加,促進(jìn)黑素合成。
補(bǔ)骨脂中補(bǔ)骨脂素和異補(bǔ)骨脂素含量測(cè)定的研究。方法采用液相色譜(HPLC)法測(cè)定,色譜柱為IntetsilODS―3柱,用甲醇-水(48∶52)為流動(dòng)相,檢測(cè)波長(zhǎng)245 m。結(jié)果平均回收率分別為98.5%,RSD為2.8%;98.8%,RSD為2.5%(n =5)。結(jié)論方法簡(jiǎn)單、快捷、,可作為補(bǔ)骨脂質(zhì)量檢測(cè)方法之一。
補(bǔ)骨脂為豆科植物補(bǔ)骨脂(Posralea corylifolia L.)的果實(shí),具溫腎助陽(yáng),納氣,止瀉之功效。收載于《中國(guó)藥典》2000年版1部,列于《開寶本草》,一名破故紙,謂:“補(bǔ)骨脂生嶺南諸州及波斯國(guó)。”……李時(shí)珍謂[1]:“補(bǔ)骨脂言其功也,胡人呼為婆固脂,而俗訛為破故紙也。”
補(bǔ)骨脂素是什么,補(bǔ)骨脂素的檢測(cè)
1 儀器和試藥
儀器:Agilent 1100(四元泵)液相色譜儀;UV3210紫外分光光度計(jì);試藥:甲醇(色譜純),水為純化水,其他試劑均為分析純。補(bǔ)骨脂素和異補(bǔ)骨脂素對(duì)照品,供含量測(cè)定用,由中檢所提供。樣品:補(bǔ)骨脂藥材購(gòu)于廣東清平中藥材市場(chǎng)。
2 方法和結(jié)果
2.1 紫外吸收波長(zhǎng)的研究分別取補(bǔ)骨脂素和異補(bǔ)骨脂素對(duì)照品溶液在200~400 nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)作光譜掃描,結(jié)果補(bǔ)骨脂素和異補(bǔ)骨脂素在245 nm處均有zui大吸收,故本含量測(cè)定項(xiàng)選擇245 nm作為檢測(cè)波長(zhǎng)。
2.2 色譜條件色譜柱:IntesilODS-3柱(5 μm,4.6 mm×250 mm),流動(dòng)相:甲醇水(48:52);流速:0.8 ml/min。檢測(cè)波長(zhǎng):245 nm;柱溫:25℃。補(bǔ)骨脂素和異補(bǔ)骨脂素的tR分別為15.9,18.2 min。
2.3 線性關(guān)系考察精密稱取補(bǔ)骨脂素和異補(bǔ)骨脂素對(duì)照品各12.5 mg,置25 ml量瓶中,加甲醇使溶解并稀釋至刻度,吸取上述對(duì)照品溶液1,2,3,4,5 ml分別置于25 ml量瓶中,加甲醇稀釋至刻度,搖勻。精密吸取上述對(duì)照品溶液10 μ1進(jìn)樣測(cè)定。以對(duì)照品進(jìn)樣量為橫坐標(biāo),峰面積積分值為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,線性回歸方程分別為:補(bǔ)骨脂素Y=382 4X+0.8,r=0.999 7;異補(bǔ)骨脂素Y=429 2X-4.533 4,r=0.999 9;結(jié)果表明:補(bǔ)骨脂素和異補(bǔ)骨脂素在進(jìn)樣量0.2~1 μg范圍內(nèi)時(shí)呈良好的線性關(guān)系。
2.4 對(duì)照品溶液和供試品溶液的制備
補(bǔ)骨脂素是什么,補(bǔ)骨脂素的檢測(cè)
2.4.1 對(duì)照品溶液的制備精密稱取補(bǔ)骨脂素和異補(bǔ)骨脂素對(duì)照品適量,加甲醇制成每毫升各含50 μg的混合溶液,即得。
2.4.2 供試品溶液的制備取本品1 g研細(xì),精密稱定,置索氏提取器中,加氯f(wàn)ang適量,加熱提取4 h,放冷,提取液回收至干,殘?jiān)蛹状际谷芙?,置?0 ml量瓶中,甲醇少量洗滌容器,洗液并入量瓶中,加甲醇至刻度,搖勻,即得。
2.5 精密度實(shí)驗(yàn)精密吸取供試品溶液10 μl,注入液相色譜儀,連續(xù)測(cè)定6次,計(jì)算補(bǔ)骨脂素和異補(bǔ)骨脂素含量。結(jié)果表明6次測(cè)定結(jié)果的平均值分別為1.47,1.72 mg/g,RSD分別為2.5%和2.8%。
2.6 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)精密吸取供試品溶液10 μl,每間隔1 h測(cè)定1次,共測(cè)定5次,再過(guò)24 h測(cè)定1次,結(jié)果表明供試品溶液在24 h內(nèi)穩(wěn)定。
2.7 重復(fù)性實(shí)驗(yàn)對(duì)同一批樣品6份,依法測(cè)定,平均含量分別為1.55 mg/g,RSD 2.4%;1.83 mg/g,RSD 2.6%,結(jié)果表明本法的重復(fù)性較好。
2.8 回收率實(shí)驗(yàn)精密稱取已知含量補(bǔ)骨脂藥材約1 g ,精密添加補(bǔ)骨脂素和異補(bǔ)骨脂素對(duì)照品適量,按供試品溶液制備方法制備,依法測(cè)定,計(jì)算回收率,結(jié)果平均回收率分別為97.5%,RSD為2.8%;98.8%,RSD為2.5%(n=5)。
2.9 樣品測(cè)定精密吸取供試品溶液10 μl,注入液相色譜儀,測(cè)定補(bǔ)骨脂素和異補(bǔ)骨脂素含量,結(jié)果5批平均含量補(bǔ)骨脂素1.32 mg/g,異補(bǔ)骨脂素1.65 mg/g。
3 討論
補(bǔ)骨脂素和異補(bǔ)骨脂素為香豆素類成分的異構(gòu)體,在《中國(guó)藥典》2000年版補(bǔ)骨脂鑒別薄層色譜條件下已能將二者分離,本實(shí)驗(yàn)采用液相色譜法測(cè)定補(bǔ)骨脂中補(bǔ)骨脂素和異補(bǔ)骨脂素的含量具有方法簡(jiǎn)單、快捷、的優(yōu)點(diǎn)。
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